2012-910
1、微波爐加熱在微波爐里加熱0.01枸櫞酸鈉緩沖液(pH6.0)至沸騰后將組織芯片放入,斷電,間隔5-10分鐘,反復(fù)1-2次。2、高壓熱修復(fù)在沸水中加入EDTA(pH8.0)或0.01m枸櫞酸鈉緩沖溶液(pH6.0).蓋上不銹鋼鍋蓋,但不能鎖定。將玻片置于金屬染色架上,緩慢加壓,使玻片在緩沖液中浸泡五分鐘,然后將蓋子鎖定,小閥門(mén)將會(huì)升起來(lái)。10分鐘后除去熱源,置入涼水中,當(dāng)小閥門(mén)沉下去后打開(kāi)蓋子。此方法適用于較難檢測(cè)或核抗原的抗原修復(fù)。(骨及軟骨組織的標(biāo)本選擇較溫和的微波加熱...
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2012-97
一、化凍將血清(FetalBovineSerum,Hyclone)從-20℃冰箱取出,放于4℃冰箱化凍過(guò)夜;也可室溫(或浸于自來(lái)水中)化凍,化凍后若不馬上滅活,可以放入4℃冰箱暫時(shí)保存;二、滅活1、放入室溫的水浴鍋內(nèi)開(kāi)始加熱(同時(shí)放入一個(gè)內(nèi)裝200ml自來(lái)水的血清瓶,插入一根溫度計(jì),溫度監(jiān)控以此為準(zhǔn));2、當(dāng)溫度計(jì)顯示56℃時(shí),控制在此溫度30分鐘±3分鐘;若不小心使溫度上升超過(guò)56℃,則:若仍未超過(guò)60℃,且時(shí)間很短(比如:不超過(guò)5分鐘),則仍可使用;若超過(guò)6...
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2012-95
1、常規(guī)方法將細(xì)胞消化成單細(xì)胞懸液;2、轉(zhuǎn)入試管,1000轉(zhuǎn)/分鐘離心5分鐘;3、配適量?jī)龃嬉海楹?0%二甲亞砜(DMSO),10%FBS的DMEM培養(yǎng)液);4、棄上清,每管加入1ml凍存液,吹打成細(xì)胞懸液(只要使ES細(xì)胞分散成3—5個(gè)細(xì)胞的小團(tuán)塊即可),轉(zhuǎn)入凍存管,作好標(biāo)簽;5.放入程序凍存盒內(nèi)24小時(shí)后轉(zhuǎn)入液氮罐中凍存。相關(guān)產(chǎn)品信息:凍存管,凍存盒,管鼓蓋,加樣槽,PCR板,PCR管架,Sigma現(xiàn)貨,Abcam抗體,GE試劑,Amresco試劑
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2012-94
1、準(zhǔn)備凍存管、凍存盒放置需液氮中保存的樣品。2、液氮中有三個(gè)取液氮容器,不宜直接將凍存管放于液氮罐中,這樣會(huì)使凍存管漂浮起來(lái)。固可用紗布、棉線將取氮容器口封住,保存樣品。3、取樣品時(shí),需要使用研缽。研缽在使用前,需清洗,并用純酒精灼燒以充分滅菌。在研磨液氮保存的樣品時(shí),需加入液氮,迅速研磨,待組織變軟,再加少量液氮,再研磨。如此三次。可用消毒過(guò)的鑰匙將研缽中的組織樣品轉(zhuǎn)入EP管中。介于所取的樣品不能*轉(zhuǎn)移到EP管中,故而在取樣時(shí)需多取樣品,以免不夠。4、新買(mǎi)的液氮罐需用一定...
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2012-93
一、提高冰箱空間使用率:1、在冰箱中制作必要的支架;2、使用凍存盒,替代各種手套、袋子、板架;3、采用節(jié)省空間的凍存管。二、對(duì)于長(zhǎng)期儲(chǔ)存的重要樣品:實(shí)驗(yàn)室重要的菌種、組織、蛋白等樣品建議可選擇二維編碼管(2D管)進(jìn)行儲(chǔ)存,避免樣本/信息的丟失、錯(cuò)用、誤用,同時(shí)實(shí)現(xiàn)樣本的有效管理。相關(guān)產(chǎn)品信息:凍存管,凍存盒,管鼓蓋,加樣槽,PCR板,PCR管架,Sigma現(xiàn)貨,Abcam抗體,GE試劑,Amresco試劑
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2012-831
一、樣品復(fù)蘇時(shí)的注意事項(xiàng)1、注意做好個(gè)人防護(hù),如護(hù)目鏡、面罩、手套、防護(hù)服,避免炸傷2、盡量使用鑷子3、水浴鍋/燒杯上覆蓋毛巾二、樣品復(fù)蘇時(shí)1、對(duì)于未經(jīng)保護(hù)的凍存管,切忌快速扔進(jìn)水浴中。2、凍存管從液氮液相取出后必須在液氮?dú)庀嘀袃?chǔ)存24h,這樣可以使得液氮從凍存管中慢慢的蒸發(fā)和逃逸,從而降低凍存管中的壓力。3、凍存管從液氮液相取出后快速放置于-20度冰箱30min,再進(jìn)行水浴復(fù)蘇。4、凍存管從液氮取出后,用手輕輕擰松管蓋,使液氮蒸發(fā)后再進(jìn)行水浴復(fù)蘇。5、對(duì)于不需水浴復(fù)蘇的樣品...
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2012-829
一、與液氮接觸的樣品需在操作時(shí)注意:1、急凍或長(zhǎng)期液氮儲(chǔ)存的樣品會(huì)接觸到液氮;2、不建議用微量離心管;3、對(duì)管口進(jìn)行密封,避免液氮滲透;4、液氮滲入的風(fēng)險(xiǎn):炸管、樣品間交叉污染;5、轉(zhuǎn)移過(guò)程中注意使用冰盒。二、生物安全柜中操作凍存管:1、單手操作,避免污染,解決靜電、管子滑落等問(wèn)題;2、用力適中,避免扭力過(guò)度造成脫絲,影響密封效果。三、注意做好標(biāo)記:1、管蓋和管壁均做標(biāo)記;2、推薦使用冷凍標(biāo)簽紙和低溫記號(hào)筆。相關(guān)產(chǎn)品信息:凍存管,凍存盒,管鼓蓋,加樣槽,PCR板,PCR管架,...
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2012-828
1、使用前用油性白板筆在每個(gè)凍存管上標(biāo)記上細(xì)菌的名稱(chēng),每支凍存管只可接種。2、在無(wú)菌條件下,打開(kāi)凍存管的螺旋瓶蓋。3、用接種環(huán)挑取新鮮細(xì)菌純培養(yǎng)物(18-24小時(shí)),放入凍存液中。擰緊瓶蓋,來(lái)回顛倒使細(xì)菌乳化,配成大約3-4麥?zhǔn)媳葷岫鹊木鷳乙海ㄒ话阋粋€(gè)平板的純培養(yǎng)物可保存兩管)。此時(shí)細(xì)菌懸液會(huì)吸附在小瓷珠內(nèi)外表面,隨后進(jìn)行高壓滅菌消毒處理。4、用無(wú)菌移液器將凍存管中的菌懸液盡量吸出。吸出的菌懸液應(yīng)放入消毒液中。5、擰緊瓶蓋.記錄下接種細(xì)菌的詳細(xì)情況。6、將接種完細(xì)菌的凍存管放...
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